Введение
По данным Американского онкологического общества (ACS), примерно у 147 950 человек будет диагностирован колоректальный рак и примерно 53 200 человек умрут от колоректального рака, при этом, по оценкам, в 2020 году 3640 человек умрут среди лиц моложе 50 лет. Колоректальный рак является третьей наиболее распространенной причиной смертности от рака (кроме заболеваний, вызванных раком кожи) среди мужчин и женщин за пределами США, что делает его третьей наиболее распространенной причиной смертности от рака среди мужчин и женщин вне кожи в Соединенных Штатах.
Колоректальная аденома может прогрессировать до поздней стадии аденомы (размером > 1 см и/или ворсинчатой гистологии) и, в конечном итоге, до колоректального рака. Накопление мутаций и изменений в эпигенетике приводят к развитию колоректальной аденомы в колоректальный рак. Этот процесс занимает около 10-15 лет, но в некоторых условиях (например, у больных с синдромом Линча) может развиваться быстрее.
Около 65% случаев КРР носят спорадический характер, а остальные являются семейными. Около 85% спорадических колоректальных раков демонстрируют хромосомную нестабильность (CIN) и сопровождаются изменениями числа хромосом и структурными аномалиями. Около 15% спорадических колоректальных раков имеют фенотип микросателлитной нестабильности (MSI) с высокой частотой.5,6 15% случаев спорадического колоректального рака имеют высокочастотный фенотип микросателлитной нестабильности (MSI). В последние годы биомаркеры, которые способствуют ранней диагностике и скринингу КРР, привлекают все большее внимание.
Ранним колоректальным раком называют колоректальную эпителиальную опухоль любого размера с ограниченной глубиной инфильтрации в слизистой и подслизистой оболочке, независимо от метастазов в лимфатические узлы. При эндоскопии его разделяют на 3 типа (морфологические типы развития).
Тип просвета: образование имеет выраженный просвет и кишечную полость, диаметр его дна значительно меньше максимального диаметра поражения (на ножке или на ножке);
Или поражение имеет полусферическую форму и диаметр основной части явно больше диаметра головки поражения.
Плоский тип: люди с высоким и низким поражением или плоским поднятием вместе называются плоским типом.
Тип поверхностной депрессии: у пациентов с очевидной депрессией по сравнению с эндоскопической ультрасонографией окружающей слизистой оболочки наблюдалось утолщение слизистой оболочки, нарушение слоев, прерывание и исчезновение границ слоев при колоректальных поражениях, а также небольшие неравномерные гипоэхогенные тени.
Колоректальная аденома может прогрессировать до поздней стадии аденомы (размером > 1 см и/или ворсинчатой гистологии) и, в конечном итоге, до колоректального рака. Накопление мутаций и изменений в эпигенетике приводят к развитию колоректальной аденомы в колоректальный рак. Этот процесс занимает около 10-15 лет, но в некоторых условиях (например, у больных с синдромом Линча) может развиваться быстрее.
Около 65% случаев КРР носят спорадический характер, а остальные являются семейными. Около 85% спорадических колоректальных раков демонстрируют хромосомную нестабильность (CIN) и сопровождаются изменениями числа хромосом и структурными аномалиями. Около 15% спорадических колоректальных раков имеют фенотип микросателлитной нестабильности (MSI) с высокой частотой.5,6 15% случаев спорадического колоректального рака имеют высокочастотный фенотип микросателлитной нестабильности (MSI). В последние годы биомаркеры, которые способствуют ранней диагностике и скринингу КРР, привлекают все большее внимание.
Ранним колоректальным раком называют колоректальную эпителиальную опухоль любого размера с ограниченной глубиной инфильтрации в слизистой и подслизистой оболочке, независимо от метастазов в лимфатические узлы. При эндоскопии его разделяют на 3 типа (морфологические типы развития).
Тип просвета: образование имеет выраженный просвет и кишечную полость, диаметр его дна значительно меньше максимального диаметра поражения (на ножке или на ножке);
Или поражение имеет полусферическую форму и диаметр основной части явно больше диаметра головки поражения.
Плоский тип: люди с высоким и низким поражением или плоским поднятием вместе называются плоским типом.
Тип поверхностной депрессии: у пациентов с очевидной депрессией по сравнению с эндоскопической ультрасонографией окружающей слизистой оболочки наблюдалось утолщение слизистой оболочки, нарушение слоев, прерывание и исчезновение границ слоев при колоректальных поражениях, а также небольшие неравномерные гипоэхогенные тени.
Состояние методов скрининга и диагностики
В настоящее время для скрининга КРР используется множество скрининговых тестов, включая неинвазивные и инвазивные тесты. gFOBT (рекомендационный анализ кала на скрытую кровь), иммунохимический тест кала (FIT), FIT-DNA (многоцелевой анализ фекальной ДНК), тест SEPT9 и тесты прямой визуализации (колоноскоп, КТ-колоноскопия и сигмоидоскопия) проводятся в США. Рабочая группа (USPSTF) указана в качестве текущей программы скрининга колоректального рака.
gFOBT не чувствителен к скринингу поздних стадий колоректальных опухолей. Среди оппортунистического и процедурного скрининга КРР количественное сопоставление стало наиболее широко используемым неинвазивным исследованием. Но уровни f-Hb могут значительно меняться изо дня в день, что может сильно повлиять на результат;
одна дефекация была настолько бессистемной, что возникли опасения, что образцы не были репрезентативными;
ограниченная чувствительность к распространенной аденоме и требует повторного скрининга.
Колоноскопический скрининг и наблюдение имеют хорошо документированные преимущества в снижении риска развития колоректального рака за счет прямого удаления предраковых поражений и раннего обнаружения CRC10 и уже давно являются золотым стандартом скрининга и диагностики рака толстой кишки. Но наиболее склонны к колоноскопия – это пропущенный диагноз. Наиболее частыми пропущенными диагнозами являются аденомы менее 10 мм, атипичные зубчатые полипы и липомы.
gFOBT не чувствителен к скринингу поздних стадий колоректальных опухолей. Среди оппортунистического и процедурного скрининга КРР количественное сопоставление стало наиболее широко используемым неинвазивным исследованием. Но уровни f-Hb могут значительно меняться изо дня в день, что может сильно повлиять на результат;
одна дефекация была настолько бессистемной, что возникли опасения, что образцы не были репрезентативными;
ограниченная чувствительность к распространенной аденоме и требует повторного скрининга.
Колоноскопический скрининг и наблюдение имеют хорошо документированные преимущества в снижении риска развития колоректального рака за счет прямого удаления предраковых поражений и раннего обнаружения CRC10 и уже давно являются золотым стандартом скрининга и диагностики рака толстой кишки. Но наиболее склонны к колоноскопия – это пропущенный диагноз. Наиболее частыми пропущенными диагнозами являются аденомы менее 10 мм, атипичные зубчатые полипы и липомы.
Молекулярные механизмы раннего развития КРР
Наследственность и эпигенетика
Утрата геномной и/или эпигеномной стабильности наблюдалась при большинстве ранних неоплазий (т.е. аномальных поражений крипт, аденом и зубчатых полипов), и их потеря ускоряет накопление мутаций онкогенов и генов-супрессоров опухолей, а также эпигенетических изменений. Злокачественная трансформация клеток толстой кишки обусловлена этими мутациями и эпигенетическими изменениями в ходе цикла клональной экспансии, отбираемого для клеток с наиболее агрессивным и злокачественным поведением. Микросателлитная нестабильность (MSI), хромосомная нестабильность (CIN) и фенотип метилирования CpG-островков (CIMP) являются тремя основными путями, которые вызывают развитие колоректальной аденомы в рак. Таким образом, вещества, участвующие в процессе наследственности и эпигенетики КРР, могут использоваться в качестве молекулярных маркеров для мониторинга прогресса КРР и способствовать ранней диагностике КРР. Некоторые из них подтверждены, другие еще изучаются.
Фенотип метилатора CpG-островка Помимо мутаций, два механизма гиперметилирования промотора и хромосомной нестабильности (CIN) также приводят к разрушению функции гена и участвуют в прогрессировании аденомы в рак. CIMP относится к подмножеству CRC с большим количеством промоторных генов CpG-островков, которые широко гиперметилированы. В нормальных клетках сайт CpG, расположенный на промоторе CpG-островка, не подвергается метилированию; Но при колоректальном раке (КРР) все наоборот: около 10% экспрессируются в нормальных эпителиальных клетках толстой кишки активных генов15; Принцип заключается в том, что гиперметилирование промоторного CpG-островка инактивирует активно экспрессируемые гены-супрессоры опухолей или гены, связанные с опухолью, что приводит к ряду изменений в клетках, таких как стимуляция пролиферации клеток или ингибирование апоптоза или старения, тем самым способствуя онкогенезу. Транскрипция многих генов должна зависеть от метилирования CpG-островков в промоторных областях генов. Однако, как только гиперметилирование этих CpG-островков изменится, оно будет ингибировать связывание факторов транскрипции с промоторной областью, что приведет к инактивации гена. ПЦР-обнаружение может четко обнаружить изменения метилирования ДНК, поэтому CIMP является хорошей мишенью для раннего обнаружения CRC, например, промотор гена SEPT9.
Фенотип метилатора CpG-островка Помимо мутаций, два механизма гиперметилирования промотора и хромосомной нестабильности (CIN) также приводят к разрушению функции гена и участвуют в прогрессировании аденомы в рак. CIMP относится к подмножеству CRC с большим количеством промоторных генов CpG-островков, которые широко гиперметилированы. В нормальных клетках сайт CpG, расположенный на промоторе CpG-островка, не подвергается метилированию; Но при колоректальном раке (КРР) все наоборот: около 10% экспрессируются в нормальных эпителиальных клетках толстой кишки активных генов15; Принцип заключается в том, что гиперметилирование промоторного CpG-островка инактивирует активно экспрессируемые гены-супрессоры опухолей или гены, связанные с опухолью, что приводит к ряду изменений в клетках, таких как стимуляция пролиферации клеток или ингибирование апоптоза или старения, тем самым способствуя онкогенезу. Транскрипция многих генов должна зависеть от метилирования CpG-островков в промоторных областях генов. Однако, как только гиперметилирование этих CpG-островков изменится, оно будет ингибировать связывание факторов транскрипции с промоторной областью, что приведет к инактивации гена. ПЦР-обнаружение может четко обнаружить изменения метилирования ДНК, поэтому CIMP является хорошей мишенью для раннего обнаружения CRC, например, промотор гена SEPT9.
Микросателлитная нестабильность. Микросателлит представляет собой короткую последовательность, состоящую из 16 оснований. Он многократно распределяется в кодирующих и некодирующих областях всего генома. По этой причине они особенно подвержены ошибкам во время репликации, но обычно их можно исправить с помощью системы MMR. Взаимодействие четырех белков MLH1, MSH2, MSH6 и PMS2 образует систему репарации MMR. Система восстановления MMR обнаруживает несоответствие генов и устраняет его. В это время под действием ДНК-полимеразы и ДНК-лигазы правильная цепь ДНК может повторно синтезироваться и рекомбинироваться. Когда MSI возникает в кодирующих областях генов, участвующих в некоторых ключевых клеточных функциях и путях, он может иметь канцерогенный потенциал.
Хромосомная нестабильность CIN относится к наследственному явлению, при котором клетки организма человека склонны к спонтанному разрушению или индуцированию поломок. Ядро будет мутировать из-за CIN, что приведет к образованию анеуплоида, расширению субкариотипа, хромосомной перестройке и высокочастотной потере гетерозиготности локусов генов-супрессоров опухоли. Распознавание опухолей CIN объясняется накоплением мутаций протоонкогенной GTPазы KRAS (KRAS), протоонкогенной серин/треониновой киназы B-Raf (BRAF) и генов-супрессоров опухолей, таких как APC и опухолевый белок p53 (TP53). тем самым произошло продвижение CRC. Инактивация APC является первым событием в процессе CIN, а онкогенная мутация KRAS возникает на стадии аденомы, а затем она трансформируется в злокачественную опухоль посредством делеции хромосомы 18q и инактивации гена-супрессора опухоли TP53 на хромосоме 17p. Геномные изменения, связанные с колоректальным раком, показаны на рисунке 1. Мутации в сигнальном пути WNT обычно вызывают колоректальный рак, а затем опухолевые клетки следуют другим сигнальным путям (включая RAS, RAF, MAPK, трансформирующий фактор роста-TGF-TGF, p53). и фосфатидилинозитол-киназа (PI3 K)/AKT) прогрессируют во время расслабления.
Хромосомная нестабильность CIN относится к наследственному явлению, при котором клетки организма человека склонны к спонтанному разрушению или индуцированию поломок. Ядро будет мутировать из-за CIN, что приведет к образованию анеуплоида, расширению субкариотипа, хромосомной перестройке и высокочастотной потере гетерозиготности локусов генов-супрессоров опухоли. Распознавание опухолей CIN объясняется накоплением мутаций протоонкогенной GTPазы KRAS (KRAS), протоонкогенной серин/треониновой киназы B-Raf (BRAF) и генов-супрессоров опухолей, таких как APC и опухолевый белок p53 (TP53). тем самым произошло продвижение CRC. Инактивация APC является первым событием в процессе CIN, а онкогенная мутация KRAS возникает на стадии аденомы, а затем она трансформируется в злокачественную опухоль посредством делеции хромосомы 18q и инактивации гена-супрессора опухоли TP53 на хромосоме 17p. Геномные изменения, связанные с колоректальным раком, показаны на рисунке 1. Мутации в сигнальном пути WNT обычно вызывают колоректальный рак, а затем опухолевые клетки следуют другим сигнальным путям (включая RAS, RAF, MAPK, трансформирующий фактор роста-TGF-TGF, p53). и фосфатидилинозитол-киназа (PI3 K)/AKT) прогрессируют во время расслабления.
Прогностические молекулярные маркеры в молекулярном механизме раннего колоректального рака
Наиболее распространенные мутации при колоректальном раке включают мутации APC, катенина-β1 (CTNNB1), KRAS, BRAF, члена семейства 4 SMAD (SMAD4), рецептора 2 трансформирующего фактора роста-β (TGFBR2), TP53, фосфатидилинозитол-4,5-. каталитическая субъединица-α бисфосфат-3-киназы (PIK3CA), которая способствует онкогенезу путем нарушения функции ключевых сигнальных путей, включая β-катенин WNT, эпидермальный фактор роста (EGF), митоген-активируемую протеинкиназу (MAPK), фосфатидилинозитол-3-киназу (PI3 K) и сигнальные пути TGFβ, или путем воздействия на гены, которые регулируют центральное поведение клеток, такое как репарация и пролиферация ДНК. Таким образом, обнаружение этих мутированных генов может в определенной степени отражать прогресс колоректального рака, осуществлять раннюю диагностику колоректального рака и достигать цели раннего выявления и раннего лечения. В таблице 1 перечислены молекулярные маркеры, которые позволяют предсказать раннюю стадию колоректального рака.
APC Аденоматозный полипоз Coli (APC) представляет собой ген онкосупрессора, который действует как клеточный хранитель, предотвращая развитие опухолей в толстой кишке. Но APC станет онкогеном FAP, когда он мутирует в зародышевой линии. Мутация APC является первым проявлением колоректального рака и может рассматриваться как маркер прогнозирования раннего колоректального рака. Когда ген APC мутирует, образуется разрушенный комплекс, тем самым ингибируя деградацию тандемного белка. После этого процесса может накопиться много катенина. Затем катенин перемещается в ядро, и активируется транскрипция регуляторных генов tcf, способствуя пролиферации клеток. Следовательно, диспластические клетки начинают расти при стимуляции мутаций APC или других механизмов, нарушающих сигнальный путь WNT. Эти клетки первоначально захватили крипты и постепенно сформировали полипы. Таким образом, мутация APC считается хорошим диагностическим маркером для выявления лиц с риском развития CRC.
TP53 TP53 — это ген-супрессор опухоли, расположенный на коротком плече хромосомы 17. Он всегда определялся как ген-хранитель генома и участвует во многих клеточных процессах, включая восстановление ДНК, остановку клеточного цикла, старение, апоптоз и метаболическую реакцию. на различные сигналы стресса. Примерно 50–70% мутаций CRC в р53, которые являются генами-супрессорами опухолей, положительно коррелируют с плохим прогнозом. Следовательно, когда TP53 теряет свою функцию, это будет способствовать пролиферации поврежденной ДНК в дочерние клетки и злокачественному развитию CRC. В то же время ген p53 также считается прогностическим геном CRC. Между тем, ген p53 также считается прогностическим геном CRC.
TP53 TP53 — это ген-супрессор опухоли, расположенный на коротком плече хромосомы 17. Он всегда определялся как ген-хранитель генома и участвует во многих клеточных процессах, включая восстановление ДНК, остановку клеточного цикла, старение, апоптоз и метаболическую реакцию. на различные сигналы стресса. Примерно 50–70% мутаций CRC в р53, которые являются генами-супрессорами опухолей, положительно коррелируют с плохим прогнозом. Следовательно, когда TP53 теряет свою функцию, это будет способствовать пролиферации поврежденной ДНК в дочерние клетки и злокачественному развитию CRC. В то же время ген p53 также считается прогностическим геном CRC. Между тем, ген p53 также считается прогностическим геном CRC.
KRAS Ген KRAS принадлежит к семейству генов RAS. Он принадлежит к мембраносвязанному белку GTP/GDP и обладает присущей GTPase активностью. Он участвует в регуляции сигнальных путей пролиферации, дифференцировки или выживания клеток,16 а мутации обнаруживаются в 17–25% случаев рака и в 35–45% случаев CRC. ГТФаза RAS становится конститутивно активной благодаря этим мутациям.2 Однако активная RAS может индуцировать множество сигнальных путей в онкогенных клетках, что приводит к возникновению и развитию CRC. Высокая частота мутаций KRAS и их появление на относительно ранних стадиях прогрессирования опухоли показывают, что что KRAS играет незаменимую роль в онкогенезе человека. И определение того, важна ли мутация KRAS для диагностики колоректального рака. ASCO, EMSO и NCCN называют KRAS прогностическим фактором.
PIK3CA (фосфатидилинозитол-4,5-бисфосфат-3-киназа) Фосфатидилинозит-инозитол-3-киназа (PI3 K) представляет собой разновидность клеточно-специфической фосфатидилинозитол-инозитол-3-киназы, которая играет ключевую роль в различных клеточных функциях. Это приводит к увеличению сигнала PI3 K, что является одним из наиболее распространенных изменений, возникающих при раке человека. Соматические мутации часто обнаруживаются в PIK3CA и PIK3CB в раковых клетках и, как известно, вызывают активацию PI3 K. Мутация гена PIK3CA классифицируется как прогрессирующая аденома. Мутировавший ген PIK3CA может уменьшать апоптоз и способствовать инвазии и метастазированию опухоли.
PTEN (белок-гомолог фосфатазы и тензина) PTEN — это первый ген-супрессор опухоли, обладающий фосфатазной активностью. Он расположен на хромосоме 10q23 и обладает фосфатазной активностью, которая может действовать на липидные и белковые субстраты, дефосфорилируя их. PTEN дефосфорилирует PIP3 в PIP2. Потеря гена PTEN может произойти на ранних стадиях рака. Он участвует во многих клеточных процессах, таких как регуляция функции Akt (серин-треониновой протеинкиназы); Ингибирование PI3 K (фосфатидилинозитол-3-киназы) / Akt ( Pkb — сигнальный путь протеинкиназы Б); Негативно регулируют рост клеток, ингибируют пролиферацию клеток и индуцируют апоптоз клеток.
PIK3CA (фосфатидилинозитол-4,5-бисфосфат-3-киназа) Фосфатидилинозит-инозитол-3-киназа (PI3 K) представляет собой разновидность клеточно-специфической фосфатидилинозитол-инозитол-3-киназы, которая играет ключевую роль в различных клеточных функциях. Это приводит к увеличению сигнала PI3 K, что является одним из наиболее распространенных изменений, возникающих при раке человека. Соматические мутации часто обнаруживаются в PIK3CA и PIK3CB в раковых клетках и, как известно, вызывают активацию PI3 K. Мутация гена PIK3CA классифицируется как прогрессирующая аденома. Мутировавший ген PIK3CA может уменьшать апоптоз и способствовать инвазии и метастазированию опухоли.
PTEN (белок-гомолог фосфатазы и тензина) PTEN — это первый ген-супрессор опухоли, обладающий фосфатазной активностью. Он расположен на хромосоме 10q23 и обладает фосфатазной активностью, которая может действовать на липидные и белковые субстраты, дефосфорилируя их. PTEN дефосфорилирует PIP3 в PIP2. Потеря гена PTEN может произойти на ранних стадиях рака. Он участвует во многих клеточных процессах, таких как регуляция функции Akt (серин-треониновой протеинкиназы); Ингибирование PI3 K (фосфатидилинозитол-3-киназы) / Akt ( Pkb — сигнальный путь протеинкиназы Б); Негативно регулируют рост клеток, ингибируют пролиферацию клеток и индуцируют апоптоз клеток.
Молекулярные биомаркеры в кале
Идея, лежащая в основе анализа кала, заключается в том, что как ранние, так и поздние предраковые поражения могут вызывать кровотечение, которое можно обнаружить с помощью существующих технологий путем выделения клеток крови в просвет кишечника.2 ДНК, РНК и белки, используемые для обнаружения КРР в кале, показаны на рис. Таблица 2.
ДНК Поскольку кишечник человека представляет собой щелочную среду, для экономии, и высококачественная ДНК, извлеченная из ДНК, имеет преимущество, и если субъекты страдают от рака, фекалии также могут содержать много раковых клеток и опухоль, свободную от опухолевой ДНК, поэтому обнаружение метилирования генов экскрементов Метод неинвазивной диагностики колоректального рака постепенно распознает аномальное метилирование при колоректальном раке на ранней стадии. Аномальное метилирование генов в фекалиях стало высокоэффективным и менее инвазивным методом скрининга колоректальных опухолей. Обнаружение стула с помощью одного гена, такого как секретируемый белок 2, родственный завиткам (SFRP2), член семейства 4 (NDRG4), костный морфогенетический белок 3 (BMP3) и т. д. Существуют также комбинированные тесты с несколькими генами, такие как SFRP2 и фактор, ингибирующий WNT. 1 (WIF-1) комбинированные тесты.
РНК МикроРНК представляет собой одноцепочечную молекулу РНК длиной менее 22 нуклеотидов, она ингибирует трансляцию информационной РНК, а также может способствовать деградации мРНК.28,29 В последние годы исследования показали, что экспрессия генов миРНК является важным фактором регуляции транскрипции. , также является ключом к фактору адаптации онкогенеза к существованию микроРНК в тканевой жидкости крови в моче и других биологических образцах, комплексу, контролирующему трансдукцию сигнала раковых клеток и различные физиологические и патологические процессы. Ожидается, что благодаря своей тканеспецифической экспрессии микроРНК стать биомаркерами.
Исследования показали, что микроРНК могут стабильно присутствовать в фекалиях, а также существуют различия в экспрессии микроРНК в фекалиях пациентов с КРР и здоровых людей, которые можно повторно извлечь. Тест работает путем количественного определения РНК из опухолевых клеток, которые отпадают от стенок просвета и определить, есть ли у них CRC. Обобщив соответствующие отчеты, было обнаружено, что миР-92а, 30, миР-20а, 31, миР-21, 30, миР-135,32 и миР-144* дифференциально экспрессируются у пациентов с КРР. Но сейчас мы все используем небольшие объемы выборок для изучения фекальной ДНК, а методы и методы этих исследований не созрели. Однако микроРНК в качестве биомаркера может лучше указывать на образование и развитие опухолей, что делает перспективным использование фекальной микроРНК в качестве маркера для диагностики КРР.
Белок Гемоглобин в кале можно обнаружить с помощью gFOTB и FIT, но из-за низкой специфичности анализа кала на скрытую кровь на основе гваяка (gFOTB) во многих местах больше не используют gFOTB для выявления CRC или только для вспомогательной диагностики CRC. FIT считается новым FOBT на основе гваяка. Это глобулиновое антитело, которое не вступает в перекрестную реакцию с гемоглобином, содержащимся в мясе, поэтому на него не влияют продукты с более высокой активностью пероксидазы. Количественная аппроксимация дает численные оценки концентрации фекального гемоглобина (f-Hb). Хотя числовое значение f-Hb низкое, FIT имеет высокую чувствительность к CRC. Таким образом, FIT может использоваться для быстрого скрининга колоректального рака, особенно когда симптомы более серьезные.
РНК МикроРНК представляет собой одноцепочечную молекулу РНК длиной менее 22 нуклеотидов, она ингибирует трансляцию информационной РНК, а также может способствовать деградации мРНК.28,29 В последние годы исследования показали, что экспрессия генов миРНК является важным фактором регуляции транскрипции. , также является ключом к фактору адаптации онкогенеза к существованию микроРНК в тканевой жидкости крови в моче и других биологических образцах, комплексу, контролирующему трансдукцию сигнала раковых клеток и различные физиологические и патологические процессы. Ожидается, что благодаря своей тканеспецифической экспрессии микроРНК стать биомаркерами.
Исследования показали, что микроРНК могут стабильно присутствовать в фекалиях, а также существуют различия в экспрессии микроРНК в фекалиях пациентов с КРР и здоровых людей, которые можно повторно извлечь. Тест работает путем количественного определения РНК из опухолевых клеток, которые отпадают от стенок просвета и определить, есть ли у них CRC. Обобщив соответствующие отчеты, было обнаружено, что миР-92а, 30, миР-20а, 31, миР-21, 30, миР-135,32 и миР-144* дифференциально экспрессируются у пациентов с КРР. Но сейчас мы все используем небольшие объемы выборок для изучения фекальной ДНК, а методы и методы этих исследований не созрели. Однако микроРНК в качестве биомаркера может лучше указывать на образование и развитие опухолей, что делает перспективным использование фекальной микроРНК в качестве маркера для диагностики КРР.
Белок Гемоглобин в кале можно обнаружить с помощью gFOTB и FIT, но из-за низкой специфичности анализа кала на скрытую кровь на основе гваяка (gFOTB) во многих местах больше не используют gFOTB для выявления CRC или только для вспомогательной диагностики CRC. FIT считается новым FOBT на основе гваяка. Это глобулиновое антитело, которое не вступает в перекрестную реакцию с гемоглобином, содержащимся в мясе, поэтому на него не влияют продукты с более высокой активностью пероксидазы. Количественная аппроксимация дает численные оценки концентрации фекального гемоглобина (f-Hb). Хотя числовое значение f-Hb низкое, FIT имеет высокую чувствительность к CRC. Таким образом, FIT может использоваться для быстрого скрининга колоректального рака, особенно когда симптомы более серьезные.
Молекулярные биомаркеры в крови
ДНК, РНК, белки и другие молекулярные биомаркеры, используемые для выявления КРР в крови, показаны в Таблице 3.
Циркулирующая опухолевая ДНК (цДНК). В настоящее время изменения в эпигенетике цДНК изучаются как метод диагностики злокачественных опухолей и мониторинга рецидивов. Текущие исследования показывают, что свободный метилированный ген SEPT9 (mSEPT9) в периферической крови может быть использован в качестве биологической опухоли. маркер колоректального рака. Септин9, один из генов семейства SEPT, широко присутствует в эукариотических клетках и является геном-супрессором опухолей. Кодируемый им белок SEPT9 участвует в таких биологических процессах, как деление клеток, транспорт везикул и ремоделирование клеточных мембран, и все эти эволюционные процессы участвуют в развитии опухолей. А когда он метилируется, он подавляет транскрипцию и трансляцию гена SEPT9, влияя на нормальную экспрессию белка SEPT9, что приводит к потере соответствующих функций клеток, что, в свою очередь, приводит к аномалиям и раку во время деления клеток. В настоящее время оно одобрено. Первый принцип скрининга обнаружения сыворотки колоректального рака заключается в том, что qRT-PCR может использоваться для обнаружения опухолевой ДНК в периферической крови пациентов с колоректальным раком и цикла высвобождения некроза и апоптотических клеток колоректального рака. Следовательно, о риске развития КРР можно судить по уровню метилирования ДНК специфической для гена промоторной области SEPT9 в периферической крови. Помимо SEPT9, другие метилированные биомаркеры, включая тахикинин-1 (TAC1), соматостатин (somatostatin, SST) и фактор транскрипции 3, связанный с рантом (RUNX3), оказались эффективными при обнаружении нескольких образцов. Тип CRC. Но необходимо еще много исследований, чтобы доказать его роль в ранней диагностике КРР.
РНК
МикроРНК МикроРНК могут выделяться в периферическую кровь раковыми клетками, поэтому определенные циркулирующие мирны, связанные с конкретными заболеваниями, можно обнаружить в сыворотке и плазме. В последние годы изучалась корреляция между мирнами и раком, которая, как ожидается, станет потенциальным биомаркером для диагностики и мониторинга прогрессирования или лечения КРР в будущем.
Было обнаружено, что сывороточные let-7 g, 44 miR-21,37,38,43 miR-92a, 45 miR-29a являются высокочувствительными и специфичными в качестве биомаркеров для диагностики CRC.40 Исследование Imaoka et al. показало, что Мир- 1290 может способствовать эпителиально-мезенхимальной трансформации (ЕМТ), пролиферации и потенциалу метастазирования и, как ожидается, станет диагностическим маркером колоректального рака. Хотя мирны играют незаменимую роль в возникновении и развитии колоректального рака, в крови не обнаружено мирн для скрининга на КРР, что станет крупным прорывом в будущем неинвазивном обнаружении КРР.
ЦирРНК Из-за низкого уровня экспрессии циркрн, эти циркрн, как редкие типы РНК, могут рассматриваться только как транскрипционные шумы, циркрн как посттранскрипционные регуляторные фиксаторы, которые конкурируют с другими молекулами РНК за связывание белковых фрагментов. Они могут регулировать эффекты РНК-связывающих белков и молекулярную концентрацию РНК; Некоторые циклоны участвуют в регуляторных сетях эндогенных конкурентных РНК (ceRNAs). По сравнению с mirnas, circrnas не имеют конца, что также делает их устойчивыми к mirNA-опосредованной деградации РНК и другим учетным экстранукционным действиям. Биоинформатический анализ показал, что уровень большинства циркрон в тканях и клеточных линиях колоректального рака значительно снижен.41
Было обнаружено, что сывороточные let-7 g, 44 miR-21,37,38,43 miR-92a, 45 miR-29a являются высокочувствительными и специфичными в качестве биомаркеров для диагностики CRC.40 Исследование Imaoka et al. показало, что Мир- 1290 может способствовать эпителиально-мезенхимальной трансформации (ЕМТ), пролиферации и потенциалу метастазирования и, как ожидается, станет диагностическим маркером колоректального рака. Хотя мирны играют незаменимую роль в возникновении и развитии колоректального рака, в крови не обнаружено мирн для скрининга на КРР, что станет крупным прорывом в будущем неинвазивном обнаружении КРР.
ЦирРНК Из-за низкого уровня экспрессии циркрн, эти циркрн, как редкие типы РНК, могут рассматриваться только как транскрипционные шумы, циркрн как посттранскрипционные регуляторные фиксаторы, которые конкурируют с другими молекулами РНК за связывание белковых фрагментов. Они могут регулировать эффекты РНК-связывающих белков и молекулярную концентрацию РНК; Некоторые циклоны участвуют в регуляторных сетях эндогенных конкурентных РНК (ceRNAs). По сравнению с mirnas, circrnas не имеют конца, что также делает их устойчивыми к mirNA-опосредованной деградации РНК и другим учетным экстранукционным действиям. Биоинформатический анализ показал, что уровень большинства циркрон в тканях и клеточных линиях колоректального рака значительно снижен.41
Huang и соавт.35 продемонстрировали, что circHIPK3 значительно сверхэкспрессируется при колоректальном раке по сравнению с нормальными субъектами. Экспрессия Cir-ITCH была значительно снижена при колоректальном раке по сравнению с соседними нераковыми тканями. Эти исследования показывают, что определенные циклы играют решающую роль в развитии колоректального рака. Недавние исследования показали, что кольцевую РНК можно обнаружить в жидкостях организма, таких как слюна и плазма. Анализ циркулярных РНК-кандидатов на основе данных RNA-SEQ показал, что экзосомы колоректального рака были более распространены, чем экзосомы донорских клеток, что позволяет предположить, что циркулярные РНК могут участвовать в развитии и прогрессировании колоректального рака.
Однако молекулярная роль циркРНК в профилактике, диагностике и лечении колоректального рака не совсем ясна. Но поскольку обнаруживается все больше и больше циркулярных РНК, которые присутствуют в изобилии в слюне, экзосомах и образцах крови, циркулярные РНК, несомненно, стали важными маркерами в процессе развития колоректального рака.
Однако молекулярная роль циркРНК в профилактике, диагностике и лечении колоректального рака не совсем ясна. Но поскольку обнаруживается все больше и больше циркулярных РНК, которые присутствуют в изобилии в слюне, экзосомах и образцах крови, циркулярные РНК, несомненно, стали важными маркерами в процессе развития колоректального рака.
Белки CEA и CA 19-9 обладают низкой чувствительностью и специфичностью при скрининге колоректального рака и поэтому широко используются для мониторинга ответа на лечение колоректального рака.10
sDC-SIGN/sDC-SIGNR Ген DC-SIGN человека расположен в 19p13.3, трансмембранном белке типа II с молекулярной массой 44 кДа и длиной примерно 13 т.п.н. Исследования показали, что DC-SIGN может играть важную роль в адгезионной миграции ДК и воспалительной реакции, активируя начальные Т-клетки и инициируя иммунный ответ, а также иммунный уход патогенов и опухолей. DC-SIGNR называется Молекула, родственная DC-SIGN (DC-SIGNR). Ген DC-SIGNR соседствует с аналогичной структурой DC-SIGN и имеет 77% гомологию по аминокислотной последовательности, а молекулярная структура также очень похожа. Цзян и др. проанализировали корреляцию между уровнями экспрессии sDC-SIGN и sDC-SIGNR в сыворотке и CEA и CA199 в сыворотке и не обнаружили корреляции, предполагая, что sDC-SIGN и sDC-SIGNR в сыворотке могут быть новыми маркерами колоректального рака.
Более того, хотя sDC-SIGN и sDC-SIGNR являются гомологичными молекулами, тенденции их экспрессии в сыворотке больных раком толстой кишки различны. По сравнению со здоровыми людьми уровень sDC-SIGN ниже у больных ранним раком толстой кишки, тогда как уровень sDC-SIGNR выше, чем у здоровых людей.
Исследование также показало, что уровни sDC-SIGN и sDC-SIGNR в сыворотке могут использоваться в качестве диагностики рака толстой кишки, особенно биомаркеры ранней диагностики сывороточных sDC-SIGN для диагностики рака толстой кишки обладают высокой чувствительностью и играют роль при колоректальном раке. скрининг, а сывороточный sDC-SIGNR обладает высокой специфичностью, играет роль в диагностике колоректального рака и дифференциальном, комбинированный диагностический анализ проводится для двух видов маркеров, оба достигают взаимодополняемости в процессе совместной диагностики, чувствительность и специфичность превышают 90% , что указывает на высокую диагностическую ценность.
sDC-SIGN/sDC-SIGNR Ген DC-SIGN человека расположен в 19p13.3, трансмембранном белке типа II с молекулярной массой 44 кДа и длиной примерно 13 т.п.н. Исследования показали, что DC-SIGN может играть важную роль в адгезионной миграции ДК и воспалительной реакции, активируя начальные Т-клетки и инициируя иммунный ответ, а также иммунный уход патогенов и опухолей. DC-SIGNR называется Молекула, родственная DC-SIGN (DC-SIGNR). Ген DC-SIGNR соседствует с аналогичной структурой DC-SIGN и имеет 77% гомологию по аминокислотной последовательности, а молекулярная структура также очень похожа. Цзян и др. проанализировали корреляцию между уровнями экспрессии sDC-SIGN и sDC-SIGNR в сыворотке и CEA и CA199 в сыворотке и не обнаружили корреляции, предполагая, что sDC-SIGN и sDC-SIGNR в сыворотке могут быть новыми маркерами колоректального рака.
Более того, хотя sDC-SIGN и sDC-SIGNR являются гомологичными молекулами, тенденции их экспрессии в сыворотке больных раком толстой кишки различны. По сравнению со здоровыми людьми уровень sDC-SIGN ниже у больных ранним раком толстой кишки, тогда как уровень sDC-SIGNR выше, чем у здоровых людей.
Исследование также показало, что уровни sDC-SIGN и sDC-SIGNR в сыворотке могут использоваться в качестве диагностики рака толстой кишки, особенно биомаркеры ранней диагностики сывороточных sDC-SIGN для диагностики рака толстой кишки обладают высокой чувствительностью и играют роль при колоректальном раке. скрининг, а сывороточный sDC-SIGNR обладает высокой специфичностью, играет роль в диагностике колоректального рака и дифференциальном, комбинированный диагностический анализ проводится для двух видов маркеров, оба достигают взаимодополняемости в процессе совместной диагностики, чувствительность и специфичность превышают 90% , что указывает на высокую диагностическую ценность.
АДГ В слизистой оболочке прямой кишки человека существует множество изоферментов алкогольдегидрогеназы (АДГ) (в том числе изменение активности изофермента АДГ Ⅰ наиболее очевидно) и изофермента альдегиддегидрогеназы (АЛДГ). Длительное употребление этанола приводит к образованию ацетальдегида, высокотоксичного канцерогенного соединения, в присутствии АДГ. Длительное употребление этанола приводит к образованию ацетальдегида, высокотоксичного канцерогенного соединения, в присутствии АДГ. Теоретически ацетальдегид будет разлагаться под действием АЛДГ, но исследования показали, что активность АЛДГ мало чем отличается между раковыми и нормальными клетками. Другими словами, раковые клетки обладают сильной способностью окисляться до ацетальдегида из экзогенного этанола, но имеют слабую способность выводить ацетальдегид. В эксперименте Джельски активность общего вазопрессина и изофермента I в опухолевых тканях была значительно выше, чем в нормальных тканях. слизистой оболочки, что может указывать на то, что эти изменения могут отражаться на активности ферментов в сыворотке. Они также обнаружили, что на разных стадиях колоректального рака общий АДГ в плазме в каждом периоде был значительно выше, чем в контрольной группе, и АДГ Ⅰ положительно коррелировали, и чем позже речь идет о стадии колоректального рака, тем выше чувствительность АДГ Ⅰ.41 Общая чувствительность к АДГ в сыворотке может достигать 60%, чувствительность к АДГ Ⅰ может достигать 76%, а площадь под кривой ROC для АДГ I составляла 0,72, поэтому сывороточный АДГ (особенно АДГ Ⅰ) может быть маркером раннего выявления КРР.
Интерлейкин
Цитокин-интерлейкин 8 (IL-8) Цитокины представляют собой категорию растворимых пептидов и выполняют различные функции, такие как регулирование врожденного иммунитета и адаптивного иммунного роста гемопоэтических клеток, а также восстановление поврежденных тканей, которые участвуют в канцерогенезе колита и колоректальной аденомы. Цитокины делятся на 3 типа: хемокинский лимфоидный фактор и интерферон, из которых интерлейкин-8 в хемокине является наиболее многообещающим кандидатом для ранней диагностики КРР. Интерлейкин-8 (IL-8) является одним из наиболее значительно активируемых хемокинов при КРР и Было обнаружено, что он участвует в ангиогенезе различных клеток, включая нейтрофилы, эндотелиальные клетки, макрофаги и раковые клетки. Сообщалось, что он участвует в миграции опухолевых клеток, а его экспрессия связана с ангиогенезом, прогрессированием опухоли и метастазированием различных опухолей на моделях человека и животных. IL-8 индуцирует пролиферацию и миграцию клеток CRC, процесс, который играет важную роль посредством добычи и связывания гепарина с фактором роста эпидермального роста (EGF-подобным) (HB-EGF) в качестве основного лиганда этого пути.
Заключение
В этом обзоре рассматриваются методы скрининга и раннего выявления КРР с упором на большое количество маркеров, изучаемых в настоящее время. Постоянное совершенствование программ скрининга КРР на данном этапе направлено на выявление КРР на ранней стадии, предпочтительно на предраковой стадии, чтобы снизить смертность, связанную с КРР. Современные методы скрининга и ранней диагностики представляют собой либо быстрое реагирование на фекальные штамповки, либо неудобно, дорого и потенциально опасно, что приводит к низкой приверженности пациентов. Разумные методы скрининга и ранней диагностики должны быть удобными, чувствительными, специфичными, безопасными, экономичными и практичными. В настоящее время существующая технология требует высокой степени участия и соблюдения различных схем скрининга, требующих коррекции всех конгенеров. Что еще более важно, необходимо разработать экономически эффективные, высокочувствительные и специфические неинвазивные методы, чтобы уменьшить беспокойство пациентов по поводу скрининга КРР и улучшить приемлемость процесса скрининга.
Из-за увеличения потенциального процесса и нарушения понимания молекулярных путей геномика может во многом повлиять на раннее выявление рака, колоректального рака, из-за этого множество новых и лучших биомаркеров и молекулярных изменений помогают аденоме перейти в карциному, злокачественную трансформацию, поскольку развитие идей имеет большое значение для обнаружения биомаркеров колоректального рака в тестах на колоректальный рак, исследования в последние годы имели огромный прогре. Но большая часть функций мутаций еще не полностью ясна, поэтому ясны молекулярные свойства в роли диагностических решения о тестах и лечении по-прежнему ограничены. Разработка более простых в применении методов молекулярного обнаружения раннего КРР имеет решающее значение для улучшения прогноза и эффективности лечения, что требует дальнейших исследований.
Из-за увеличения потенциального процесса и нарушения понимания молекулярных путей геномика может во многом повлиять на раннее выявление рака, колоректального рака, из-за этого множество новых и лучших биомаркеров и молекулярных изменений помогают аденоме перейти в карциному, злокачественную трансформацию, поскольку развитие идей имеет большое значение для обнаружения биомаркеров колоректального рака в тестах на колоректальный рак, исследования в последние годы имели огромный прогре. Но большая часть функций мутаций еще не полностью ясна, поэтому ясны молекулярные свойства в роли диагностических решения о тестах и лечении по-прежнему ограничены. Разработка более простых в применении методов молекулярного обнаружения раннего КРР имеет решающее значение для улучшения прогноза и эффективности лечения, что требует дальнейших исследований.